Содержание

Надбавка за сложность и напряженность

В соответствии с Положением об установлении надбавок за высокие достижения в труде, сложность и напряженность работы руководителям и специалистам начисляется надбавка за сложность и напряженность, минимальный размер которой – 20% от оклада. При выполнении определенных показателей размер надбавки может быть увеличен до 100%.

Можно ли увеличивать минимальный размер надбавок отдельным работникам, если соотношение роста производительности труда и номинальной начисленной среднемесячной заработной платы составляет менее 1,0?

Формы, системы и размеры оплаты труда работников, в т.ч. стимулирующие (надбавки, премии, бонусы и иные выплаты) и компенсирующие (доплаты в соответствии со ст.ст. 62, 67, 69 и 70 ТК и иные выплаты) выплаты, устанавливаются нанимателем на основании коллективного договора, соглашения, иных локальных правовых актов (ЛПА) и трудового договора (ст.

63 ТК).

В соответствии с п. 1 постановления Совмина от 31.07.2014 № 744 «Об оплате труда работников» (далее – постановление № 744) в государственных организациях и организациях, в уставном фонде которых доля собственности государства составляет более 50%, повышение размеров оплаты труда работников производится при условии соотношения роста производительности труда и номинальной начисленной среднемесячной заработной платы более 1,0. Допускается изменение размеров оплаты труда и (или) структуры заработной платы работникам в пределах общего размера оплаты труда, установленного ЛПА и трудовыми договорами.

С учетом изложенного, если указанное повышение размеров оплаты труда касается роста составляющих заработной платы (увеличение их размера), то для выполнения норм постановления № 744 такое увеличение не должно превысить…

Автор публикации:

Анна ЯКУШЕВА

Об установлении надбавки за сложность и напряженность руководителю центра, созданного для обеспечения деятельности бюджетных организаций.

Бюджетный учет. Налоги. Аналитические материалы.

Главное управление труда и заработной платы по поручению руководства Министерства труда и социальной защиты в пределах компетенции сообщает (письмо Минтруда и соцзащиты от 17.07.2020 № 1-1-21/879-ЮР «О разъяснении законодательства»).

В соответствии с подпунктом 1.2 пункта 1 постановления Совета Министров Республики Беларусь от 31 декабря 2019 г. № 948 работникам центров, создаваемых для обеспечения деятельности бюджетных организаций, устанавливается надбавка за сложность и напряженность (далее – надбавка) в размере до 100 процентов суммы окладов работников.

Средства, не использованные по фонду оплаты труда за отчетный период (месяц, квартал, полугодие), могут направляться на выплату надбавки в последующие периоды финансового года.

При этом общий размер средств, направленный на выплату надбавки работникам центра, в том числе и руководителю, за конкретный месяц, не может превышать 100 процентов суммы окладов работников центра.

Условия оплаты труда руководителя центра устанавливаются трудовым договором (контрактом), заключаемым с ним соответствующим собственниками имущества либо уполномоченным им органом (пункт 7 Инструкции о порядке и условиях оплаты труда работников бюджетных организаций и иных организаций, получающих субсидии, работники которых приравнены по оплате труда к работникам бюджетных организаций, утвержденной постановлением Министерства труда и социальной защиты Республики Беларусь от 03.04.2019 № 13).

Размер надбавки руководителю центра, установленный трудовым договором (контрактом), может изменяться.

Изменения в трудовой договор (контракт) вносятся в установленном законодательством порядке.

По информации официального сайта Министерства финансов Республики Беларусь

Надбавка за сложность и напряженность работы

руп писал(а):

А где можно прочитать, что субъективное мнение?
В норматиловке вообще ничего нет.
Ко мне пристали проверяющие что при отсутствии вакансии неззя, помогите отбиться
То утверждение, что размер надбавки за сложность и напряженность устанавливается исходя из решений нанимателя, исходит из анализа трудовго законодательства, касающегося этого вопроса. Более того, это должно быть прописано в Ваших локальных нормативно-правовых актах.
А что касается утверждения проверяющих, что при отсутствии вакансии эту надбавку устанавливать не имеете право, то они здесь условно правы отчасти. В названии этой нормы “Надбавка за сложность и напряженность” уже определены моменты и условия, при которых она применяется. Другими словами, должно произойти некое усложнение и иметь место некая напряженность в выполнении задания. Одним из таких факторов может послужить наделение работника дополнительными функциями по вакантной должности. Однако, это не единственная причина, которая может послужить возникновению сложности и напряженности выполнения работы. Такими факторамит могут быть, как выполнение обязанностей отсутствующего работника, так и: увеличение объема работ, в силу каких либо производственно-организационных причин, которая требует повышения интенсивности труда работника; работа в постоянно присутствующих условиях форс-мажора, когда от работника требуется повышенное внимание на протекающие процессы; иные особенности выполнения задач.

В Вашем случаи, если проверяющие настаивают на нелигитимности применения этой надбавки, в силу того, что отсутствует некая вакансия, заблуждаются сами и вводят Вас в заблуждение.

1. ПОСТАНОВЛЕНИЕ МИНИСТЕРСТВА ТРУДА РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ от 21 января 2000 г. N 6 “О МЕРАХ ПО СОВЕРШЕНСТВОВАНИЮ УСЛОВИЙ ОПЛАТЫ ТРУДА РАБОТНИКОВ ОРГАНИЗАЦИЙ, ФИНАНСИРУЕМЫХ ИЗ БЮДЖЕТА И ПОЛЬЗУЮЩИХСЯ ГОСУДАРСТВЕННЫМИ ДОТАЦИЯМИ”
п.2.8. устанавливать надбавки руководителям, специалистам и служащим за высокие профессиональные, творческие, производственные достижения в работе, сложность и напряженность труда, а также за выполнение особо важных (срочных) работ в размере до 50 процентов оклада (ставки), направляя на эти цели выделенные из бюджета средства в размере 10 процентов планового фонда заработной платы работников организации. Конкретные размеры надбавок определяются в зависимости от личного вклада работника в повышение эффективности проводимых мероприятий, выполняемых работ (услуг). Указанные надбавки уменьшаются либо отменяются полностью при ухудшении качества работы.


2. ПОСТАНОВЛЕНИЕ МИНИСТЕРСТВА ТРУДА И СОЦИАЛЬНОЙ ЗАЩИТЫ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ от 28 апреля 2006 г. N 54 “О РЕКОМЕНДАЦИЯХ ПО ОРГАНИЗАЦИИ ЗАРАБОТНОЙ ПЛАТЫ НА ОСНОВЕ ЕДИНОЙ ТАРИФНОЙ СЕТКИ РАБОТНИКОВ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ”
Надбавки за высокие достижения в труде, сложность и напряженность работы, выполнение особо важной (срочной) работы на срок их проведения и другие показатели руководителям, специалистам и другим служащим коммерческих организаций всех организационно-правовых форм выплачиваются в соответствии с условиями и в размерах, установленных нанимателем в коллективных договорах, соглашениях, трудовых договорах (контрактах).
Такие виды надбавок целесообразно устанавливать тем категориям работников, у которых имеются показатели измерения этих достижений (план, задание и др.) и содержание их труда характеризуется стабильностью выполняемых заданий (начальникам цехов, участков, мастерам, специалистам линейных и функциональных подразделений).
Оценка качества выполняемых работ специалистов для установления надбавки за высокие достижения в труде, сложность и напряженность работы должна производиться на основе учета объема и сложности выполняемых обязанностей, предусмотренных должностными инструкциями, нормами труда, сроков и качества их выполнения, а также критериев, характеризующих квалификацию работника, его компетентность, ответственность и инициативность в работе.
Общими критериями оценки работника для установления вышеуказанных надбавок могут быть:
образование;
степень соответствия образования занимаемой должности;
умение работать на компьютере;
стаж работы по специальности и знание специфики организации;
уровень этичности общения в коллективе;
самостоятельность и творчество в работе;
своевременность и качество выполнения задания;
способность доводить дело до конца;
интенсивность труда;
готовность к постоянному повышению квалификации и обучению новому.
При установлении этих надбавок работникам по конкретным функциям управления, например службы технического контроля, критериями оценки высоких достижений в труде, помимо перечисленных, являются: осуществление мер по выявлению и предотвращению случаев брака, нарушений технологической дисциплины, сокращению рекламаций. Работникам по организации и нормированию труда должно учитываться повышение уровня нормирования в обслуживаемых ими подразделениях: повышение удельного веса норм, рассчитанных по отраслевым и межотраслевым нормативам, и выполнение их большинством рабочих, обеспечение снижения трудоемкости продукции (изделия), равнонапряженность норм труда; рациональное использование всех трудовых и материальных ресурсов.

Достижения в труде работников, которым установлены соответствующие надбавки, оцениваются ежегодно по показателям, принятым для установления надбавок.
Надбавки за выполнение особо важной и сложной работы на срок ее выполнения устанавливаются специалистам и руководителям подразделений с целью концентрации их усилий на качественном и своевременном выполнении этих работ.
Перечень особо важных и сложных работ, должностей работников, которым могут устанавливаться надбавки за их выполнение, определяются руководителем организации по согласованию с профсоюзным комитетом и отражаются в коллективном договоре. К числу особо важных работ быть отнесены следующие работы: создание высокопроизводительных и эффективных машин, механизмов, отвечающих по своим технико-экономическим показателям высшему мировому уровню, отдельных особо важных деталей и узлов, совершенствование и внедрение прогрессивных технологий и передовых методов организации производства и труда, а также другие работы, обеспечивающие значительную экономию трудовых, материальных и финансовых ресурсов.

Размер надбавки, порядок и срок ее выплаты определяются руководителем организации по согласованию с профкомом и отражаются в колдоговоре, соглашении, трудовом договоре. Для одного работника, как правило, устанавливается одна надбавка. В исключительных случаях возможно применение надбавки за высокие достижения в труде и выполнение особо важной (срочной) работы на срок ее проведения.
В соответствии с постановлением Совета Министров Республики Беларусь от 24 декабря 1998 г. N 1972 “О дополнительных мерах по совершенствованию оплаты труда работников отраслей экономики” (с изменениями и дополнениями) общая сумма средств, направляемых на выплату надбавок за высокие достижения в труде, выполнение особо важной (срочной) работы и другие показатели, выплачиваемых руководителям, специалистам и другим служащим коммерческих организаций и включаемых в затраты по производству и реализации продукции (работ, услуг), учитываемые при ценообразовании и налогообложении, не должны превышать 30% суммы должностных окладов этих категорий работников.
Расчет суммы надбавок при включении в себестоимость продукции (работ, услуг) производится в целом по организации от суммы должностных окладов руководителей, специалистов и других служащих за фактически отработанное время. Конкретному работнику размер надбавок не ограничен в пределах общей суммы на выплату надбавок.
Положением об условиях оплаты труда руководителей государственных организаций и организаций с долей собственности государства в их имуществе, утвержденным постановлением Совета Министров Республики Беларусь от 25 июля 2002 г. N 1003 “Об усилении зависимости оплаты труда руководителей организаций от результатов финансово-хозяйственной деятельности”, предусмотрено, что надбавки за сложность и напряженность работы устанавливаются в размере до 50% должностного оклада. Порядок их установления, а также условия их снижения или отмены определяются органом, заключившим контракт.

Думаю, уже этого будет достаточно, что бы “сбить спесь” в действиях Ваших проверяющих.

Удачи!

Надбавки за сложность и напряженность

Вообще то этот топик на другую тему, но, раз уж задали вопрос здесь….

Статья 69 ТК “Оплата за работу в сверхурочное время, в государственные праздники, праздничные и выходные дни”
Каждый час работы в сверхурочное время оплачивается:
1) работникам со сдельной оплатой труда – не ниже двойных сдельных расценок;
2) работникам с повременной оплатой труда, а также получающим должностные оклады, – не ниже двойных часовых тарифных ставок (окладов).
По договоренности с нанимателем работнику за работу в сверхурочное время может предоставляться другой день отдыха.
Работа в государственные праздники, праздничные (часть первая статьи 147) и выходные дни оплачивается не ниже чем в двойном размере по правилам части первой настоящей статьи. При этом для работников, получающих месячный оклад, оплата производится в размере не ниже одинарной часовой тарифной ставки (оклада) сверх месячного оклада, если работа производилась в пределах месячной нормы рабочего времени, и в размере не ниже двойной часовой тарифной ставки (оклада) сверх месячного оклада, если работа производилась сверх месячной нормы.
За работу в сверхурочное время, в государственные праздники, праздничные (часть первая статьи 147) и выходные дни премии начисляются на заработок по одинарным сдельным расценкам или на одинарную тарифную ставку.

Таким образом, законодательство обязывает нанимателя оплатить в размере на ниже двойного тарифа, в случае, когда работа производилась сверх установленной графиком нормы, и не запрещает нанимателю оплачивать часы, отработанные в праздничные дни, но в рамках установленного графика, в размере превышающим одинарный тариф. При этом, в правоприменительной практике, наниматель, конечно же, отработанные часы в праздничные дни, но в рамках установленного графика, оплачивает не более, чем в одинарном размере, не нарушая тем самым нормы трудового законодательства.

Конвергентная организация аберрантного комплекса MYB контролирует экспрессию онкогенных генов при остром миелоидном лейкозе

Уважаемые д-р Дэвидсон и д-р Струл,

.

Спасибо за помощь с этой рукописью. Я хочу подчеркнуть, насколько освежающим и конструктивным был процесс Review Commons с eLife. Я также хочу отметить, что ваши предложения очень полезны. Исходя из этого, мы пересмотрели рукопись, включив новые данные о стабильности MYB и изменив выводы, чтобы более точно отразить результаты.

Мы благодарим рецензентов за их конструктивные предложения, которые существенно улучшили эту работу. Мы полностью пересмотрели рукопись и подробно описали отдельные ответы ниже:

Рецензент №1 (Доказательства, воспроизводимость и ясность (обязательно)):

Исследование Forbes et al. описывает и характеризует основанный на пептидах ингибитор взаимодействия MYB:CBP 2-го поколения, названный CRYBMIM, который они используют для изучения взаимодействий MYB:кофактор в клетках лейкемии.CRYBMIM обладает улучшенными свойствами по сравнению с пептидом MYBMIM и демонстрирует большую эффективность в биохимических и клеточных анализах. Используя комбинацию эпигеномных и биохимических скринингов, авторы определяют список кофакторов-кандидатов MYB, функциональное значение которых в качестве зависимостей от ОМЛ подтверждается анализом базы данных DepMap. Используя полногеномное профилирование занятости TF и ​​CBP, авторы предоставляют доказательства того, что обработка CRYBMIM перепрограммирует интерактом MYB таким образом, что определенные цис-элементы непропорционально изменяются по сравнению с другими.Иными словами, общий паттерн занятости многих TF/кофакторов показывает усиление и потерю специфических цис-элементов, что приводит к сложной модуляции функции MYB и изменениям транскрипции в лейкозных клетках.

В целом, это сильное, хорошо написанное исследование с четкими экспериментальными результатами и относительно простыми выводами. Терапевтический потенциал модуляции MYB при раке огромен, и поэтому я считаю, что это исследование вызовет широкий интерес в области рака и, вероятно, будет широко цитироваться.Ниже я перечисляю несколько контрольных экспериментов, которые прояснят специфику CRYBMIM.

1) Связывается ли CRYBMIM с другими доменами KIX, такими как MED15. Было бы важно оценить специфичность этого пептида на предмет того, связывается ли он с другими доменами KIX.

Мы проанализировали все известные последовательности доменов KIX человека и обнаружили, что наиболее похожим на CBP/P300 является MED15 (38% идентичности), как показано на исправленном рисунке 2 — дополнение к рисунку 1D. Сходство последовательностей остальных доменов KIX человека существенно ниже.Чтобы определить специфичность CRYBMIM в связывании CBP/P300 по сравнению с MED15, мы подвергли экстракты клеток ОМЛ человека биотинилированному CRYBMIM, иммобилизованному на стрептавидиновых гранулах, по сравнению с одними гранулами. В то время как CRYBMIM эффективно связывается с CBP/P300, он не проявляет какого-либо измеримого связывания с MED15 (даже несмотря на то, что MED15 высоко экспрессируется), как показано на исправленной фигуре 2 — дополнение к фигуре 1E. Хотя это не исключает возможности того, что CRYBMIM связывается с другими белками, наблюдаемая здесь биохимическая специфичность в сочетании с генетической потребностью CBP для клеточных эффектов CRYBMIM, как показано с помощью полногеномного скрининга CRISPR (рис. 1B), указывает на то, что CRYBMIM является специфический лиганд CBP/P300.Рукопись была соответствующим образом отредактирована.

2) Аналогично, было бы полезно провести масс-спектрометрический анализ для всех ядерных факторов, которые связаны с иммобилизованным стрептавидином CRYBMIM. Это снова поможет читателю понять специфичность этого пептида.

Мы согласны с автором обзора в том, что макромолекулярные лиганды, такие как CRYBMIM, могут сложным образом взаимодействовать с клеточными белками. Чтобы определить конкретные эффекты, мы использовали четыре ортогональные стратегии, описанные ниже.

Сначала мы очистили CBP-содержащий ядерный комплекс с помощью иммунопреципитации и определили его состав с помощью протеомики масс-спектрометрии. Этот анализ выявил 833 белка, которые специфически связаны с CBP (пересмотренный дополнительный файл 3). Хотя это технически возможно, тот факт, что CBP связан с сотнями белков, затруднил бы интерпретацию эксперимента, предложенного рецензентом, потому что было бы серьезной проблемой отличить белки, связанные непосредственно с пептидом, от белков, очищенных косвенно в силу того факта. что CRYBMIM связывается с CBP/P300, который, в свою очередь, связывается со многими другими белками.Хотя недавно мы разработали усовершенствованные методы сшивания протеомики масс-спектрометрии, которые позволяют идентифицировать прямые межбелковые взаимодействия (Ser, Cifani, Kentsis 2019, https://doi.org/10.1021/acs.jproteome.9b00085), мы считаем, что эти эксперименты выходят за рамки текущей рукописи, которая уже включает 40 новых рисунков как часть этой редакции.

Вместо этого эксперимента мы очищали CBP-содержащий ядерный комплекс после обработки CRYBMIM или контроля с помощью иммунопреципитации и определяли его состав с помощью направленного вестерн-блоттинга.Этот анализ показал, что RUNX1, LYL1 и SATB1 специфически связаны с CBP (пересмотренная фигура 12B), среди которых RUNX1 специфически ремоделируется в комплексе MYB:CBP/P300 при связывании CRYBMIM. Это рекрутирование и ремоделирование факторов транскрипции подтверждают идею специфичности CRYBMIM для комплекса MYB:CBP/P300.

Во-вторых, для определения специфичности CRYBMIM мы использовали глициновые мутанты CRYBMIM и его родительского MYBMIM, CG3 и TG3 соответственно, в которых остатки, образующие ключевой солевой мостик и гидрофобные взаимодействия с KIX, заменены глицинами, но в остальном сохраняют все остальные особенности активных зондов.И CG3, и TG3 демонстрируют значительно сниженное влияние на жизнеспособность клеточных линий ОМЛ, что согласуется со специфическими эффектами CRYBMIM (рис. 3D).

Чтобы подтвердить, что это связано со связыванием CBP, мы очистили клеточный CBP/P300 путем связывания с биотинилированным CRYBMIM и обнаружили, что он может эффективно конкурировать с избытком свободного CRYBMIM, но не с TAT (рис. 2E).

Наконец, чтобы окончательно установить, что клеточный CBP отвечает за эффекты CRYBMIM, мы создали изогенные клеточные линии, которые либо дефицитны, либо способны к CBP, используя редактирование генома CRISPR.Этот эксперимент продемонстрировал, что дефицит CBP придает значительную устойчивость к CRYBMIM, указывая на то, что CBP необходим для эффектов, опосредованных CRYBMIM (пересмотренная фигура 4). Мы соответствующим образом переработали рукопись.

3) Основное ограничение этого исследования, которое несколько снижает мой энтузиазм в отношении этой работы, заключается в том, что предложенная здесь механистическая модель секвестрированных MYB TF основана на номинальной интерпретации данных IP-MS в сочетании с данными ChIP-seq. Обычно я ожидаю, что такой механизм будет поддерживаться некоторыми дополнительными сфокусированными биохимическими экспериментами по конкретным взаимодействиям, чтобы дополнить все омические подходы.Например, могут ли авторы оценить и/или подтвердить, как MYB физически взаимодействует с LYL1, CEBPA, SPI1 или RUNX1. Являются ли эти взаимодействия прямыми или косвенными? Какие домены этих белков задействованы? Модулирует ли лечение CRYBMIM способность этих белков связываться друг с другом в coIP? Происходят ли эти взаимодействия в нормальных гемопоэтических клетках? На протяжении всего исследования утверждается, что это аберрантные комплексы TF, но я считаю, что для поддержки этого утверждения требуется больше доказательств.

Мы ценим комментарий рецензента и полностью согласны с этим пунктом. Чтобы изучить, как MYB аберрантно собирает факторы транскрипции при ОМЛ, мы провели коиммунопреципитацию MYB (ко-IP) на панели из семи генетически разнообразных клеточных линий ОМЛ с различной восприимчивостью к CRYBMIM, выбранных для представления распространенных и рефрактерных форм ОМЛ человека. Здесь мы подтвердили совместную сборку CBP/P300, LYL1, E2A, LMO2 во всех протестированных клеточных линиях ОМЛ и совместную сборку SATB1 и CEBPA, специфичную для типа клеток, как показано на пересмотренном рисунке 8A, что согласуется с Результаты IP-MS и ChIP-seq.Мы дополнительно подтвердили эти выводы совместными IP-исследованиями CBP/P300, как показано на исправленном рисунке 8B. Мы провели аналогичные эксперименты с co-IP в нормальных гематопоэтических клетках-предшественниках и обнаружили, что большинство совместно собранных факторов в клетках AML не наблюдались в нормальных клетках, за исключением CBP/P300 и LYL1, как показано на пересмотренном рисунке 9E. В сочетании с явно аберрантной экспрессией E2A и SATB1 в клетках ОМЛ, но не в нормальных клетках крови, это приводит нас к выводу, что MYB собирает аберрантные комплексы факторов транскрипции в клетках ОМЛ.Эти комплексы могут ремоделироваться ингибиторами пептидомиметиков, что приводит к их перераспределению на хроматине, подавлению экспрессии онкогенных генов и индукции клеточной дифференцировки. Мы подтвердили этот механизм прямыми биохимическими экспериментами на клетках ОМЛ, продемонстрировав разборку и ремоделирование комплексов CBP/P300, как показано на исправленном рисунке 12. По крайней мере, некоторые из этих взаимодействий являются прямыми, учитывая известное прямое связывание между MYB и CEBPA (Oelgeschläger). , Nuchprayoon, Lüscher, Friedman 1996, https://doi.org/10.1128/mcb.16.9.4717). Мы соответствующим образом переработали текст рукописи.

Рецензент №1 (значимость (обязательно)):

В целом, это сильное, хорошо написанное исследование с четкими экспериментальными результатами и относительно простыми выводами. Терапевтический потенциал модуляции MYB при раке огромен, и поэтому я считаю, что это исследование вызовет широкий интерес в области рака и, вероятно, будет широко цитироваться.

Мы ценим это мнение и полностью согласны с рецензентом.Феномен, описанный в этой работе, представляет собой первую в своем роде демонстрацию аберрантной организации комплексов контроля факторов транскрипции при раке и ее фармакологической модуляции. Мы считаем, что эта концепция послужит преобразующей парадигмой для понимания контроля над онкогенными генами и разработки эффективных методов лечения для его окончательного лечения.

Рецензент №2 (Доказательства, воспроизводимость и ясность (обязательно)):

В этой рукописи сообщается о создании нового и улучшенного ингибитора-миметика пептида взаимодействия между MYB и CBP/P300.Исходный ингибитор этого взаимодействия MYBMIM, о котором недавно сообщила та же лаборатория, был модифицирован добавлением и заменой пептидных последовательностей из CREB, таким образом улучшая аффинность полученного пептида CRYBMIM к CBP/P300. Улучшенный профиль ингибитора приводит к повышению эффективности CRYBMIM против ОМЛ по сравнению с MYBMIM. Авторы продолжают изучать механизм, лежащий в основе активности CRYBMIM против ОМЛ, путем интеграции анализа экспрессии генов, секвенирования иммунопреципитации хроматина и масс-спектрометрической идентификации белковых комплексов в клетках ОМЛ человека.

У меня есть несколько незначительных вопросов, которые авторы могут прокомментировать:

1) Перемещение MYB вместе с CBP/P300 к генам, контролирующим миелоидную дифференцировку (кластеры 4 и 9) при лечении CRYBMIM, напоминает повышенное связывание MYB с миелоидными генами продифференцировки в клетках ОМЛ после молчания RUVBL2, недавно сообщается в Armenteros-Monterroso et al., 2019. Знают ли авторы, есть ли какое-либо совпадение между генами в любом из кластеров и списком, представленным в последнем исследовании?

Мы благодарим рецензента за это предложение.Мы также наблюдаем как RUVBL2, так и RUVBL1 в белковом комплексе, специфически связанном с MYB (рис. 7A и B). Мы сравнили изменения экспрессии генов, вызванные CRYBMIM, с изменениями, о которых сообщают Armenteros-Monterroso et al. в 2019 г. (https://doi.org/10.1038/s41375-01

-8) и обнаружили, что 37% генов, активированных сайленсингом RUVBL2, были общими с генами, индуцированными обработкой CRYBMIM. Кроме того, активированные гены в кластере 4 и 9 включали гены, связанные с миелоидной дифференцировкой, такие как JUN , FOS и FOSB, , которые также индуцировали сайленсинг RUVBL2.Мы пересмотрели рукопись, чтобы отразить эту ассоциацию.

2) Могут ли авторы прокомментировать возможный механизм, объясняющий совместную локализацию MYB и CBP/P300 в локусах в кластерах 4 и 9 после обработки CRYBMIM? Возможно ли, что CBP/P300 рекрутируется другими факторами транскрипции в эти локусы, независимо от связывания с MYB? Или связывание CBP/P300 с MYB в этих локусах каким-то образом более устойчиво к разрушению с помощью CRYBMIM?

Рецензент обратил внимание на интересный момент. По крайней мере, для кластера 9 эти гены демонстрируют усиление CBP/P300 в связи с RUNX1 (рис. 11A), что мы подтверждаем прямыми биохимическими исследованиями комплексов MYB и CBP/P300, иммунопреципитированных из клеток AML (пересмотренный рисунок 12B-C). Эти эксперименты показывают, что обработка CRYBMIM разрушает комплексы MYB:CBP/P300, что приводит к увеличению сборки CBP/P300 с RUNX1. Эти находки согласуются с механизмом динамической конкуренции, который регулирует доступность CBP/P300 для коактивации транскрипции, при которой отдельные факторы транскрипции конкурируют за ограниченные количества CBP/P300.Этот возможный механизм обсуждается в пересмотренной рукописи.

3) В тексте говорится: «Ранее мы обнаружили, что MYBMIM может подавлять экспрессию генов, зависимую от MYB:CBP/P300, что приводит к апоптозу клеток ОМЛ, что требует опосредованного MYB подавления BCL2 (Ramaswamy et al., 2018)». Я думаю, что это опечатка, поскольку в этом исследовании лечение MYBMIM приводит к потере связывания MYB с геном BCL2 и последующему снижению экспрессии BCL2. Имеют ли авторы в виду «опосредованное MYBMIM подавление BCl2» или «потерю опосредованной MYB активации BCL2»?

Мы благодарим рецензента и исправили эту опечатку в тексте.

4) Авторы объясняют неспособность избыточного CREBMIM вытеснить CBP/P300 из иммобилизованного CREBMIM (рис. 1E-F) природой взаимодействия CREB:CBP/P300. Означает ли это, что CREBMIM не может нарушить взаимодействие между CREB и CBP/P300 в живых клетках и что CBP/P300, очищенный из нативных лизатов MV4;11 с помощью иммобилизованного CREBMIM, был из пула, не связанного с CREB?

Мы благодарим рецензента за это замечание. Действительно, мы воспроизводимо наблюдаем, что связывание CRYBMIM с CBP может конкурировать с избытком свободного CRYBMIM, но связывание CREBMIM не может быть завершено избытком CREBMIM.Это может быть связано с разной стабильностью комплексов СВР, доступных для связывания в клетках. В качестве альтернативы также возможно, что связывание CREB с CBP, как показано CREBMIM, имеет относительно медленную скорость диссоциации по сравнению с MYB, как показано CRYBMIM. Мы начали очищать клеточные комплексы CBP (пересмотренный рисунок 8 и ответ на комментарий 2 для рецензента 1) и стремимся определить их детерминанты в будущих исследованиях, что стало возможным благодаря введению зондов CRYBMIM, CREBMIM и MLLMIM в текущую работу.

Рецензент №2 (значимость (обязательно)):

Основываясь на этом интегративном анализе, авторы предлагают убедительную гипотезу, включающую сборку аберрантных комплексов факторов транскрипции и секвестрацию P300/CBP из генов, участвующих в нормальном развитии миелоидов, для онкогенной активности MYB при ОМЛ. Помимо очевидного терапевтического потенциала самого ингибитора CRYBMIM, данные, представленные здесь, открывают множество направлений для будущих исследований новых терапевтических стратегий против ОМЛ.Это инновационное и важное исследование.

Это исследование будет интересно ученым и клиницистам, занимающимся исследованиями лейкемии, а также биологии рака в целом.

Область моей специализации: биология лейкемии, модели лейкемии, активность аберрантного фактора транскрипции при лейкемии

Мы ценим и согласны с этой оценкой.

Рецензент №3 (Доказательства, воспроизводимость и ясность (обязательно)):

В этой рукописи описывается улучшенный пептид-миметик MYB (см. более раннюю работу группы, опубликованную в Nature Communications, 2018) и его влияние на клеточные линии ОМЛ.Он также описывает – и это составляет большую часть статьи – динамику занятости хроматина MYB и другими ассоциированными транскрипционными факторами при нарушении взаимодействия MYB-CBP/P300. Авторы предполагают, что это представляет собой переход от онкогенной программы к программе миелоидной дифференцировки.

Основные комментарии:

Относительно улучшенного сродства и биологической активности CRYBMIM:

1) Улучшена аффинность CRYBMIM cf MYBMIM: понятно, улучшена, но ненамного.По MST увеличение сродства примерно в 3 раза. С точки зрения воздействия на жизнеспособность клеток ОМЛ: прямого сравнения нет, и это следует включить. В предыдущей статье группы нет прямой оценки MYBMIM, но похоже, что IC50 составляет от 10 до 20 мкМ, поэтому эффект снова примерно в 2,5 раза. Кроме того, эффекты аминокислотных замен в CG3 также очень малы (2,4x), учитывая, что изменены 3 критических остатка. Это очень важно.

Как указано рецензентом, CRYBMIM демонстрирует несколькократное увеличение аффинности связывания, измеренное с использованием очищенных белков in vitro.Аналогичное увеличение клеточной активности наблюдается после кратковременного лечения клеток ОМЛ, как показано на пересмотренном рисунке 3C. Однако увеличение продолжительности лечения до нескольких дней приводит к существенному улучшению кажущейся клеточной активности (рис. 3G). Например, в то время как MYBMIM вызывает примерно 100-кратное снижение жизнеспособности клеток MV411, CRYBMIM вызывает более чем 1000-кратное снижение. Точно так же, в то время как MYBMIM продемонстрировал относительно умеренное воздействие на клетки OCIAML3 и SKM1, CRYBMIM вызывает более чем 1000-кратное снижение жизнеспособности клеток.Как мы показываем в пересмотренной рукописи, это, по-видимому, связано с комбинацией повышенной биохимической аффинности и специфического протеолиза MYB, которые взаимодействуют, чтобы вызвать обширное ремоделирование транскрипционных комплексов MYB и экспрессии генов (пересмотренный рисунок 10). В целом, это пример того, как фармакологические модуляторы белковых взаимодействий могут достигать значительного повышения биологической активности за счет относительно скромных эффектов аффинности, концепция, которая недавно успешно использовалась для разработки различных PROTAC, которые используют этот «управляемый событиями» в отличие от занятости. управляемая фармакология.Рукопись была пересмотрена, чтобы прояснить этот момент.

2) Действительно ли КРИБМИМ “щадит” нормальные кроветворные клетки? Не согласно рисунку 2E, где имеется только двукратная разница в IC50.

Чтобы лучше определить относительную токсичность CRYBMIM и MYBMIM, мы исследовали их влияние на рост и выживание нормальных гемопоэтических клеток-предшественников по сравнению с клетками ОМЛ, используя тесты на формирование колоний в метилцеллюлозе в более физиологических условиях в присутствии гемопоэтических цитокинов человека (пересмотрено Рисунок 3Е).В то время как CRYBMIM значительно снижал клоногенную способность, рост и выживаемость клеток ОМЛ MV411, в этих условиях не было значительного влияния на общую клоногенную активность нормальных CD34+ клеток-предшественников пуповинной крови человека. В самой высокой дозе CRYBMIM индуцировал умеренное снижение образования колоний CFUMG и умеренное увеличение образования колоний BFU-E нормальных гемопоэтических клеток-предшественников. Мы пересмотрели рукопись, чтобы указать, что CRYBMIM «относительно щадит» нормальные клетки крови-предшественники.

3) Рисунок 2E и дополнительный рисунок S2 кажутся противоречивыми. Последний не показывает влияния 20 мкМ CRYBMIM на образование колоний нормальными клетками CD34+, в отличие от уничтожения с IC50 12,8 мкМ на рисунке 2E. Для рисунка S2 нет положительного контроля, т.е. работает ли пептид в условиях анализа колоний? Это ДОЛЖНО быть рассмотрено.

Благодарим за внимание к этому вопросу. В оригинальной рукописи мы показали кривые доза-реакция клеток-предшественников пуповинной крови, культивированных в суспензии с добавлением эмбриональной бычьей сыворотки, системы, которая, как известно, вызывает соответствующую дифференцировку гемопоэтических клеток (https://doi. org/10.1016/j.molmed.2017.07.003). В пересмотренной рукописи мы показываем результаты анализа образования колоний гемопоэтических клеток-предшественников, культивируемых в бессывороточных полутвердых условиях с добавлением гемопоэтических цитокинов человека (пересмотренные рисунки 3E и 3F). Это более физиологичная система, которая более точно поддерживает нормальную дифференцировку гемопоэтических клеток по сравнению с клеточной дифференцировкой, индуцированной средой, содержащей фетальную бычью сыворотку и лишенной гемопоэтических факторов роста, которая использовалась в экспериментах в нашей оригинальной рукописи.Для установления положительного контроля, в дополнение к обработке клеток ОМЛ в тех же условиях, мы использовали доксорубицин, который является частью текущего лечения пациентов с ОМЛ и который в наших экспериментах демонстрирует значительное и выраженное снижение клоногенной способности, роста и выживаемость нормальных клеток-предшественников крови (пересмотренный рисунок 3 – дополнение к рисунку 1B). Рукопись была соответствующим образом отредактирована.

4) Рисунок 2F не включает линии, которые выражают очень низкие или неопределяемые уровни MYB.Некоторые из них должны быть включены для дальнейшего изучения специфичности.

Теперь мы протестировали CRYBMIM на большой панели некроветворных опухолевых и неопухолевых клеточных линий с различной степенью экспрессии MYB. Некоторые из этих клеток демонстрируют высокий уровень экспрессии гена MYB и генетическую зависимость от MYB, что, по крайней мере, частично коррелирует с восприимчивостью к CRYBMIM. (пересмотренный рисунок 3 — дополнение к рисунку 2A). Рукопись была соответствующим образом отредактирована.

Влияние на экспрессию генов и связывание MYB:

Данные об экспрессии генов-мишеней MYB и апоптозе/дифференцировке, а также сделанные выводы сами по себе верны, но:

5) Рисунок S3, по-видимому, показывает, что белок MYB теряется при лечении CRYBMIM. Это даже не упоминается в тексте, но вызывает целый ряд важных вопросов, например, почему это так? Является ли это причиной потери взаимодействия MYB-p300 и/или биологического воздействия на клетки ОМЛ? Это то, что отвечает за эффекты на экспрессию целевого гена MYB на рис. 3 и связывание MYB с хроматином на рис. 4? Это необходимо решить.

Мы пересмотрели рукопись, чтобы включить это обсуждение, и провели дополнительные эксперименты, чтобы определить это явление.Мы подтвердили быстрое снижение уровней белка MYB при обработке CRYBMIM в течение времени от одного до четырех часов в различных клеточных линиях ОМЛ (пересмотренный рисунок 10), при этом скорость потери белка MYB коррелирует с восприимчивостью клеток к CRYBMIM (пересмотренный рисунок 10). ). Рукопись была соответствующим образом отредактирована.

Это согласуется со специфическим протеолизом MYB, индуцированным пептидомиметическим ремоделированием комплекса MYB:CBP/P300. Мы подтвердили это путем комбинированного лечения ингибитором протеосом/протеазы MG132 (пересмотренная фигура 10C). Этот эффект был специфичным, поскольку избыточная экспрессия BCL2 , который блокирует апоптоз, индуцированный MYBMIM (Ramaswamy et al., Kentsis, https://doi.org/10.1038/s41467-017-02618-6), не могла спасти CRYBMIM- индуцированный протеолиз MYB, утверждая, что протеолиз MYB является специфическим эффектом CRYBMIM, а не неспецифическим последствием апоптоза. Рукопись была соответствующим образом отредактирована.

6) Рисунку 4 и сопроводительному тексту немного сложно следовать, но если я правильно их понял, я удивлен, что «полученные пики MYB» не включают сам мотив связывания MYB? По крайней мере, это заслуживает некоторого комментария.Кроме того, по-видимому, не предпринималось никаких попыток интегрировать данные ChIP-seq с данными экспрессии на рисунке 3. Это дало бы более четкое представление об идентичности и типах генов, регулируемых MYB, на которые непосредственно влияет подавление CBP. /p300 связывается с MYB.

Мы благодарим рецензента за это предложение. Пересмотренная рукопись теперь включает всесторонний и интегрированный анализ динамики экспрессии хроматина и генов. В отличие от модели, в которой блокада MYB:CBP/P300 индуцирует потерю экспрессии генов и потерю транскрипционного фактора и занятости хроматина CBP/P300, мы также наблюдали большое количество генов с повышенной экспрессией и усилением занятости CBP/P300 ( пересмотренный рисунок 11 — дополнение к рисунку 1A-B).Сюда входят многочисленные гены, контролирующие гемопоэтическую дифференцировку, такие как FOS , JUN и ATF3 . В качестве репрезентативного примера, в случае FOS , мы наблюдали, что CRYBMIM-индуцированное накопление CBP/P300 было связано с повышенным связыванием RUNX1 и вытеснением CEBPA и LYL1.

Таким образом, отсутствие «приобретенных пиков MYB» связано с перераспределением CBP/P300 с альтернативными факторами транскрипции, такими как RUNX1. В целом, эти результаты подтверждают модель, в которой основная регуляторная схема клеток ОМЛ аберрантно организована MYB и связанными с ним кофакторами, включая LYL1, CEBPA, E2A, SATB1 и LMO2, которые взаимодействуют в индукции и поддержании онкогенных экспрессия генов, кооптированная различными онкогенами в биологически разнообразных подтипах ОМЛ (пересмотренная фигура 12). Это связано с очевидной секвестрацией CBP/P300 из генов, контролирующих дифференцировку миелоидных клеток. Таким образом, экспрессия онкогенных генов связана со сборкой аберрантно организованных транскрипционных коактиваторных комплексов MYB, и их динамическое ремоделирование путем селективной блокады белковых взаимодействий может индуцировать дифференцировку клеток ОМЛ. Рукопись была соответствующим образом отредактирована.

7) Исследования МС белков, взаимодействующих с MYB, кажутся очень интересными и новыми. Однако я не являюсь экспертом по РС, поэтому я бы предложил просмотреть этот раздел тому, кто им является.Более того, я не смог увидеть фактические данные этого исследования, потому что материал, который мне предоставили, не включал таблицы S4 и S5.

Мы ценим это замечание. По этой причине мы разместили все наши данные масс-спектрометрии для открытого доступа через PRIDE (регистрационный номер PXD019708), а также открыто предоставляем все проанализированные данные через Zenodo (https://doi. org/10.5281/zenodo. 4321824). ), как дополнительно предусмотрено в дополнительных материалах для этой рукописи.

Должны ли авторы квалифицировать некоторые из своих утверждений как предварительные или спекулятивные или вообще удалить их?

8) Заявления относительно биологической активности, специфичности и улучшений по сравнению с MYBMIM следует модерировать, учитывая небольшой размер этих эффектов, как указано выше (пункты 1 и 3).

Как подробно объяснялось в ответах на комментарии 1-3 выше, мы существенно переработали рукопись, чтобы включить как новые экспериментальные результаты, так и дополнительные пояснения.

9) Я нашел описание исследований, связанных с рисунками 5 и 6, несколько сложным для понимания и запутанным. В то время как изменения в оккупации хроматина MYB и CBP/p300 явно происходят при лечении M CRYBMIM, неясно, представляют ли комплексы, наблюдаемые на генах до лечения, «аберрантные» комплексы. Они могут быть характерны только для недифференцированных (миелоидных) клеток. Авторы, по-видимому, утверждают, что, поскольку некоторые из кофакторов-кандидатов демонстрируют «явно аберрантную экспрессию в клетках ОМЛ» на основе сравнения данных экспрессии (предположительно мРНК) с нормальными клетками, присутствие этих факторов в комплексах делает их «аберрантными». (более того, «оценка аберрантности» на рис. 5C, насколько я вижу, нигде не определена). Этот вывод является довольно сомнительным, учитывая, что специфические для ОМЛ факторы могут фактически не отсутствовать в комплексах в нормальных клетках.Так что этот вывод следует смягчить, если невозможно провести более прямое сравнение с MS (в чем я понимаю технические трудности).

Теперь мы измерили уровни содержания белков ключевых факторов транскрипции, собранных с помощью MYB, в клетках ОМЛ в различных нормальных гемопоэтических клетках человека (пересмотренная фигура 9). Мы обнаружили, что большинство факторов транскрипции, которые собраны с MYB в различных клеточных линиях ОМЛ, могут быть обнаружены в одной или нескольких нормальных клетках крови человека, хотя и с разным содержанием, за исключением CEBPA и SATB1, которые в значительной степени экспрессировались исключительно в клетках ОМЛ (пересмотрено Рисунок 9А). Используя неконтролируемую кластеризацию и анализ основных компонентов, мы определили комбинации факторов транскрипции, которые связаны с аберрантными функциями MYB:CBP/P300, что определяется их восприимчивостью к ремоделированию пептидомиметиков (пересмотренный рисунок 9B-D). Кроме того, мы непосредственно исследовали физическую сборку MYB с ключевыми факторами транскрипции в нормальных гемопоэтических клетках с помощью исследований ко-иммунопреципитации (пересмотренная фигура 9E). В соответствии с физической ассоциацией MYB, наблюдаемой в клеточных линиях ОМЛ, мы наблюдали ассоциацию с CBP/P300 и LYL1 в нормальных гемопоэтических клетках.Однако мы не наблюдали физической ассоциации с E2A и SATB1 в нормальных клетках, что указывает на их аберрантную ассоциацию в клеточных линиях ОМЛ. Это заставляет нас предположить, что эти комплексы собраны аберрантно, по крайней мере, частично из-за несоответствующей коэкспрессии транскрипционных факторов. Рукопись была соответствующим образом отредактирована.

Будут ли необходимы дополнительные эксперименты для подтверждения утверждений статьи?

10) Решить проблему явной потери белка MYB при лечении CRYBMIM.Если это происходит, вся предпосылка последующей работы подрывается.

Как подробно объяснялось в ответе на комментарий 5 выше, мы провели обширные исследования специфического протеолиза MYB. Мы пришли к выводу, что транскрипционные комплексы MYB регулируются как связыванием MYB:CBP/P300, так и специфическим факторным протеолизом, и могут индуцироваться его пептидомиметической блокадой в клетках ОМЛ. Такая «управляемая событиями» фармакология становится мощным инструментом для модуляции функции белка в клетках, и исследования, о которых сообщается в нашей работе, должны позволить использовать ее для улучшения терапии пациентов и улучшения исследований для фундаментальной науки.

11) Предоставление положительного контроля для эксперимента на рисунке S2.

Как подробно объяснялось в ответе на комментарий 2 выше, мы точно определили эффекты CRYBMIM и MYBMIM на клоногенную способность, рост и выживание нормальных гемопоэтических клеток-предшественников в бессывороточной метилцеллюлозной среде с добавлением гемопоэтических цитокинов человека. Эти эксперименты показали относительно умеренное воздействие (снижение на 9,3 ± 3,8%) CRYBMIM на нормальные клетки (рис. 3E) по сравнению со значительным ингибированием (54 ± 2,0%).снижение на 4 %) роста и выживания клеток ОМЛ (фиг. 3Е). Для сравнения, доксорубицин привел к снижению клоногенной способности более чем на 98 % (пересмотренный рисунок 3 — дополнение к рисунку 1B).

12) Представлены ли данные и методы таким образом, чтобы их можно было воспроизвести?

Пересмотренная рукопись включает полное описание всех методов, в том числе подробное дополнение с перечислением технических деталей, а все проанализированные данные доступны через Zenodo (https://doi.org/10.5281/zenodo.4321824).

13) Адекватно ли воспроизведены эксперименты и адекватен ли статистический анализ?

Все эксперименты проводились не менее чем в трех повторностях, при этом все количественные сравнения проводились с использованием соответствующих статистических тестов, как объяснено в рукописи.

Мелкие комментарии:

Конкретные экспериментальные проблемы, которые легко решить.

Большинство из них указаны выше.

Дополнительно:

14) Почему экспрессия BCL2 подавляется MYBMIM, а не CRYMYB?

Мы сделали такое же наблюдение и приписали это различие тому факту, что экспрессия BCL2 регулируется несколькими факторами транскрипции, включая CEBPA, на который влияет CRYBMIM, но не MYBMIM.Подобно обработке MYBMIM, занятость MYB в энхансере BCL2 снижалась при обработке CRYBMIM. Однако одновременно появились новые сайты связывания других факторов, таких как CBP/P300 и RUNX1, что свидетельствует о том, что перераспределение факторов транскрипции после обработки CRYBMIM может влиять на регуляцию транскрипции экспрессии BCL2 .

Правильно ли указаны предыдущие исследования?

Да

Являются ли текст и рисунки четкими и точными?

15) В целом, хотя некоторые детали отсутствуют, например, что означает показатель аберрантности на рисунке 5C.

Спасибо, что указали на это. Мы пересмотрели этот рисунок, чтобы прояснить этот показатель, который определяется как отношение экспрессии генов в клетках ОМЛ по отношению к нормальным гемопоэтическим клеткам-предшественникам (пересмотренный рисунок 7C).

16) Есть ли у вас предложения, которые помогли бы авторам улучшить представление своих данных и выводов?

Название этой рукописи можно и, я думаю, нужно изменить. Термин «терапевтический» не подходит, потому что в рукописи не описаны терапевтические агенты и не лечатся какие-либо формы ОМЛ, даже экспериментально.Также «CBP» следует заменить на CBP/P300, тем более что большинство данных свидетельствует о том, что P300, вероятно, является более важным партнером MYB (например, Zhao et al., 2011).

Мы согласны и изменили название, чтобы прояснить значение этой работы: «Конвергентная организация аберрантных комплексов MYB контролирует экспрессию онкогенных генов при остром миелоидном лейкозе». Мы пересмотрели рукопись, чтобы указать CBP/P300.

17) Было бы целесообразно обсудить основное наблюдение, согласно которому нарушение взаимодействия MYB-CBP/P300 фактически приводит к изменениям в связывании ДНК MYB.То, что это произойдет, вовсе не очевидно, потому что CBP/p300 не взаимодействует с ДНК-связывающим доменом MYB и не обладает внутренней ДНК-связывающей активностью.

Мы благодарим рецензента за этот комментарий и согласны с тем, что ремоделирование комплекса MYB должно влиять на связывание MYB и других кофакторов с ДНК, по крайней мере частично опосредованное потенциальным ацетилированием с помощью CBP/P300.

Рецензент №3 (значимость (обязательно)):

Природа и значение продвижения

1) Основное значение этой работы заключается в изучении занятости хроматина и комплексов MYB.Есть ряд очень интересных результатов, включая очевидное перераспределение MYB и/или CBP/P300 при лечении CRYBMIM. Это предполагает ряд изменений факторов, связанных с определенными наборами генов, участвующих в миелоидной дифференцировке, хотя, как упоминалось выше, конкретные гены-мишени не идентифицированы конкретно. Однако пути, соответствующие им, перечислены в Таблице S6.

Мы пересмотрели рукопись, чтобы включить гены-мишени в пересмотренный дополнительный файл 2, а также таблицы DESeq2 (депонированы в Zenodo, https://doi.org/10.5281/zenodo.4321824).

2) Новый дизайн пептида (CRYBMIM) интересен, но его различия в связывании и биологическом действии MYBMIM в основном носят инкрементальный характер. См. выше.

Мы с уважением не согласны и хотели бы объяснить, насколько эта работа важна как по концептуальным, так и по техническим причинам. Во-первых, хотя биохимическое сродство CRYBMIM количественно увеличивается по сравнению с MYBMIM, это количественно повышенное сродство приводит к качественно улучшенной биологической активности в результате «управляемой событиями» фармакологии, которая характеризует модуляторы взаимодействия фармакологических белков (см. также ответ рецензенту 3). , комментарий 1).MYBMIM подавляет рост и выживаемость в основном лейкозов с реаранжировкой MLL, тогда как CRYBMIM подавляет подавляющее большинство (10 из 11) изученных подтипов ОМЛ. Теперь это делает возможным его терапевтический перевод, которым мы сейчас занимаемся в сотрудничестве с Novartis. Во-вторых, его улучшенная биологическая активность привела к открытию ранее неизвестного и непредвиденного механизма секвестрации CBP/P300 для контроля онкогенных генов. Мы используем это открытие для разработки точной модели контроля аберрантных генов при ОМЛ, которая впервые объединяет ранее разрозненные наблюдения в общий механизм.Это очень важно, поскольку обеспечивает общие молекулярные зависимости для большинства подтипов ОМЛ, что является давней загадкой в ​​биологии рака.

Поместите работу в контекст существующей литературы (при необходимости укажите ссылки).

— Эта рукопись основана на отчете той же группы в Nature Communications (2018), в котором описан более ранний пептид MYBMIM, некоторые эффекты на гены-мишени MYB и на клетки ОМЛ. Эта и предыдущая статья также опираются на результаты, касающиеся роли взаимодействия MYBCBP/P300 в миелоидном лейкемогенезе (Pattabirman et al., 2014) и на предыдущих полногеномных исследованиях генов-мишеней MYB (Zhoa et al., 2011; Zuber et al., 2011).

Укажите, какая аудитория может быть заинтересована и на что могут повлиять полученные данные.

– Эта рукопись, вероятно, будет интересна ученым, интересующимся MYB как таковым, ОМЛ, геномикой рака и регуляцией транскрипции.

Определите свою область знаний с помощью нескольких ключевых слов, чтобы помочь авторам контекстуализировать вашу точку зрения. Укажите, есть ли какие-либо части статьи, для оценки которых у вас недостаточно знаний.

– Моя специализация: ОМЛ, экспериментальная гематология, транскрипция, MYB, геномика рака

3) Как упоминалось выше, я считаю, что для обзора исследований по РС требуется дополнительная экспертиза.

Мы разместили все необработанные данные в PRIDE (регистрационный номер PXD019708) и все обработанные данные в Zenodo (https://doi. org/10.5281/zenodo.4321824), сделав их доступными для сообщества для дальнейшего анализа.

[Примечание редактора: перед принятием были предложены дальнейшие изменения, как описано ниже.]

Ревизии:

Хотя авторы удовлетворительно ответили на большинство комментариев, поднятых рецензентами Review Commons, необходимо решить некоторые дополнительные вопросы, прежде чем публикация может быть рекомендована.

1) На протяжении всей рукописи авторы включают CEBPA в качестве кофактора MYB, но он не осаждается совместно с MYB ни в одном из показанных иммуноблотов, за исключением очень слабой полосы в клетках OCAIML2 на рисунке 8A. Таким образом, доказательства взаимодействия MYB-CEBPA очень незначительны.Авторам следует решить эту проблему, либо смягчив свои утверждения, либо предоставив более убедительные доказательства.

Спасибо за это замечание. Данные масс-спектрометрии показывают высокую распространенность и высокую достоверность идентификации нескольких членов семейства C/EBP, включая сам CEBPA. Однако, как указывалось, CEBPA связывается с комплексом MYB, как измерено вестерн-блоттингом, в основном в клетках OCIAML2. Таким образом, мы полностью пересмотрели рукопись, заменив CEBPA на «вариантный член (члены) семейства C/EBP», и соответствующим образом скорректировали все соответствующие утверждения.

2) Непонятно, почему инактивация CRISPR CBP, показанная на рисунке 4, может иметь такие незначительные эффекты, учитывая, что основной вывод статьи заключается в том, что взаимодействия MYB-CBP имеют решающее значение для активации генов, необходимых для роста лейкемических клеток. Авторы должны дать четкое объяснение этому очевидному несоответствию. С этим связан важный комментарий рецензента 3 из Review Commons о том, что ингибитор пептида индуцировал деградацию MYB, что ясно видно через 4 часа обработки на фиг. 11C.Учитывая это наблюдение, как авторы могут объяснить полученные пики MYB в ChIP-seq. Авторы не правильно подошли к этому вопросу. Конечно, разумно предположить, что стабильность MYB зависит от его взаимодействия с CBP и что, когда это блокируется пептидом, MYB деградирует. Но если это так, то почему инактивация CRIPSR CPB не вызывает таких же эффектов? Фактически, стабильность MYB в клетках CBP KO должна быть исследована.

Это простой и эффективный эксперимент, и мы благодарим вас за его предложение.Устойчивые уровни белка MYB, по-видимому, существенно не изменяются при истощении CBP в клетках MV411 AML по сравнению с клетками дикого типа или контрольными клетками, нацеленными с помощью CRISPR на AAVS1 .

Это предполагает, что либо P300 может компенсировать CBP-опосредованные функции, и/или протеолиз MYB не регулируется исключительно его взаимодействием с CBP/P300, но требует специфической активности CBP/P300, индуцированной CRYBMIM. Мы включили этот результат в исправленную рукопись.

В случае ассоциации MYB с хроматином при обработке CRYBMIM, измеренной с помощью ChIP-seq, их можно объяснить остаточным белком MYB после CRYBMIM-индуцированного протеолиза.Это может быть связано с защитой связанного с хроматином MYB от протеолиза или, альтернативно, с нормализацией сигнала, необходимой для анализа ChIP-seq. Локусы связывания MYB, потерянные при обработке CRYBMIM, показали значительное обогащение известными мотивами связывания MYB, в то время как полученные пики MYB этого не сделали (p = 1e-149 против 1e-3, 56% против 5,7% сайтов-мишеней соответственно). Это повышает вероятность того, что сродство ДНК-связывания MYB может регулироваться CBP/P300 либо за счет прямых эффектов, таких как деацетилирование MYB при обработке CRYBMIM, либо косвенно за счет связывания с другими факторами транскрипции.Для точного определения этого в будущих исследованиях потребуются абсолютные количественные измерения с использованием контрольных доз. Мы пересмотрели рукопись, чтобы прояснить эти моменты (рис. 6 — приложение 1 к рисунку).

https://doi.org/10.7554/eLife.65905.sa2

«Интенсивность» Пепа Гвардиолы может привести нас к большему количеству титулов Лига.

В четверг Гвардиола подписал продление контракта на сезон 2020-21, и Компания, которая ранее в этом месяце отпраздновала победу в чемпионате с «Сити» в третий раз, считает, что у тренера есть правильное сочетание знаний и подхода, чтобы добиться лучших результатов. из его игроков.

«Он довольно напряженный», — сказал Компани Алексису Нуньесу из ESPN FC. «Он очень хорошо умеет доносить то, что хочет от своих игроков. И вы знаете, некоторые вещи, которые он говорит, довольно сложны, но он делает их простыми для понимания».

“И с интенсивностью, как я уже сказал, каждый божий день, будь то тренировка или игра, посвящен победе и совершенствованию. У него есть подходящая группа игроков, чтобы сделать шаг вперед, чем он даже хочет, в следующем сезоне. ”

Сити выиграл чемпионат с рекордными 19 очками и стал первым клубом, набравшим 100 очков в Премьер-лиге.

Компания знает, как сложно защитить чемпионский титул. Соперники «Манчестер Юнайтед» были последними, кто сделал это в сезоне 2008-09, «Сити» дважды финишировал вторым в течение года после победы, но защитник считает, что у них есть качества, чтобы снова пробежать в следующем сезоне.

Винсент Компани выиграл свой третий чемпионский титул в Премьер-лиге с «Манчестер Сити» в этом сезоне. Ben Stanstall/AFP/Getty Images

«У нас в команде много молодых ребят, которые голодны», — сказал Компани. «Многие из них только что выиграли свой первый трофей. Но в то же время это только их первый трофей. Обладая способностями и талантом, мы можем выиграть гораздо больше, и это вселяет в меня большую уверенность в том, что они смогут его выиграть. снова в следующем сезоне».

Сити финишировал третьим в лиге в прошлом сезоне, отставая от победителя «Челси» на 15 очков и отставая от «Тоттенхэм Хотспур», занявшего второе место, на восемь очков, и Компания заявила, что с самого начала сезона они были мотивированы на то, чтобы улучшить свои результаты.

«Это восходит к одному и тому же: тяжелой работе», — сказал игрок сборной Бельгии. «Мы приложили столько усилий на поле и за его пределами. Мы были полны решимости и имели четкое представление о том, чего хотим достичь и куда двигаться. Это рекордный сезон, так что для нас это тоже история».

Технологии и политика по декарбонизации мировой промышленности: обзор и оценка факторов смягчения последствий до 2070 г.

Полная декарбонизация мировой промышленности необходима для стабилизации климата, а достижение нулевых выбросов парниковых газов к 2050–2070 гг. необходимо для ограничения глобального потепления до 2 °С.В этом документе собраны и оценены технические и политические вмешательства как со стороны предложения, так и со стороны спроса. В нем определены меры, которые при совместном применении могут обеспечить нулевые чистые промышленные выбросы в требуемые сроки. Ключевые технологии со стороны предложения включают энергоэффективность (особенно на системном уровне), улавливание углерода, электрификацию и использование водорода с нулевым содержанием углерода в качестве источника тепла и химического сырья. Существуют также многообещающие технологии, специфичные для каждой из трех отраслей с наибольшими выбросами: цементной, черной металлургии, химической и пластмассовой.К ним относятся добавки к цементу и альтернативные химические вещества, несколько технологических маршрутов производства стали с нулевым содержанием углерода, а также новые химические катализаторы и технологии разделения. Важнейшие подходы со стороны спроса включают рациональный дизайн материалов, сокращение отходов материалов, замену низкоуглеродных материалов на высокоуглеродистые и меры в области экономики замкнутого цикла (такие как повышение долговечности продукта, возможность повторного использования, простота ремонта и возможность вторичной переработки). Стратегическая, хорошо продуманная политика может ускорить внедрение инноваций и создать стимулы для внедрения технологий.Ценные политики включают ценообразование на выбросы углерода с корректировкой границ или другими ценовыми сигналами; мощная государственная поддержка исследований, разработок и развертывания; и стандарты энергоэффективности или выбросов. Эта основная политика должна поддерживаться маркировкой и государственными закупками низкоуглеродных продуктов, требованиями по сбору и раскрытию данных, а также стимулами для переработки. При реализации этих политик необходимо позаботиться о том, чтобы обеспечить справедливый переход для уволенных работников и затронутых сообществ. Точно так же декарбонизация должна дополнять человеческое и экономическое развитие стран с низким и средним уровнем дохода.

Эволюция светодиодной подсветки

Автор: Адам Симмонс
Последнее обновление: 14 августа 2021 г.

 

Подъем светодиода

Подсветка

LED (Light Emitting Diode) «интересна» для потребителя, поскольку помогает сделать дисплей тоньше, легче и эффективнее. Он также является победителем с точки зрения маркетинга, поскольку производители стремятся провести искусственное различие между своими «светодиодными» (с подсветкой) мониторами и их «ЖК-мониторами».Это слепо заставляет людей полагать, что технология полностью отличается от «ЖК-дисплея», а не просто изменение типа подсветки с CCFL (флуоресцентная лампа с холодным катодом) на светодиод. Быстрая регулировка яркости также позволяет производителям лучше использовать функцию «динамической контрастности», которую мы часто критикуем в наших обзорах. Практичность настройки всей задней подсветки в соответствии с общей темнотой сцены сомнительна. Но это, безусловно, позволяет играть в безумно большие и вводящие в заблуждение игры с числами с коэффициентами контрастности.

Многим потребителям ситуация казалась беспроигрышной: конечный продукт тоньше, легче, не содержит ртути и мышьяка и более энергоэффективен — потребляет меньше энергии и выделяет меньше тепла. При более глубоком изучении мониторов, использующих эту технологию, по мере того, как они становились все более распространенными, вскоре стало ясно, что еще есть место для подсветки CCFL. Стремление сделать вещи тоньше может понравиться некоторым пользователям с эстетической точки зрения, но у него есть и свои недостатки. Хотя производители в значительной степени отказались от этого в качестве ключевого аргумента в пользу продажи, некоторые модели со светодиодной подсветкой особенно тонкие и подвержены изгибу как во время, так и после производства.Это может усугубить проблемы с однородностью яркости и, в частности, вызвать проблемы с размытием и помутнением задней подсветки.

Основной недостаток более ранних технологий светодиодной подсветки связан с более узким спектральным диапазоном излучаемого ими света по сравнению с подсветкой WCG (Wide Color Gamut) CCFL. Это было ключевой причиной того, что некоторые производители не спешили отказываться от подсветки CCFL на некоторых своих «профессиональных» моделях — почти исключительно для создания более широкой цветовой гаммы, необходимой для обработки изображений и просмотра расширенных цветовых гамм, таких как Adobe RGB.Несмотря на эти потенциальные недостатки, технология была принята многими производителями в качестве «стандарта», в первую очередь по экологическим причинам и для большей части рынка.

RGB LED — редкая порода

Довольно узкий выбор мониторов со светодиодной подсветкой фактически преодолел ограничение цветовой гаммы (а затем и некоторые) за счет использования «триад» светодиодов (красный, зеленый и синий) для создания белого света широкого спектра. Эта редкая альтернатива WLED (белый светоизлучающий диод, обычная реализация, рассмотренная ниже) была известна как подсветка RGB-LED. Некоторые известные модели включают XL20, XL24 и XL30 от Samsung, производителя, который был одним из первых, кто широко внедрил технологии светодиодной подсветки как для мониторов, так и для телевизоров. Хотя конструкции RGB-LED выставляли напоказ цветовую гамму, которую не могла достичь даже подсветка WCG-CCFL, технология так и не стала популярной. Было просто слишком много недостатков; стоимость, размер, вес, дифференциальная деградация светодиодов (что со временем приводит к цветовому дисбалансу на экране) и относительно низкая энергоэффективность.


WLED – современный подход

В отличие от этих триад RGB, большинство современных решений светодиодной подсветки включают в себя размещение границы (или, в некоторых случаях, кластеров) «белых» светодиодов позади или сбоку от ЖК-матрицы, часто рядом с краями, и использование рассеивателя для рассеивания света. через экран. Несмотря на то, что их называют «белыми» светодиодами, они на самом деле излучают синий свет, который проходит через желтый люминофор, чтобы дать более нейтральный белый цвет и обеспечить красный и зеленый компоненты изображения. Ранние итерации технологии (примерно 2009-10 гг.) имели тенденцию страдать от очевидного и неисправимого смещения синего цвета. По мере того, как производители лучше знакомились с технологией и могли настраивать подсветку, люминофорные покрытия и ЖК-панели, этот оттенок становился более пригодным для использования. Несмотря на эти достижения, многие WLED-подсветки, используемые в современных мониторах, по-прежнему страдают определенным дисбалансом, когда речь идет о спектре света, который они излучают. На приведенном ниже графике представлена ​​относительная интенсивность света на различных длинах волн для «типичной» современной подсветки WLED.

Вы можете увидеть отчетливый пик спектральной энергии в «синей» области, а именно ~450 нм (свет считается «чисто синим»). Это происходит от синего диода подсветки, который обычно состоит из InGaN (нитрид индия-галлия). Гораздо более слабый спектральный отклик менее чем на треть интенсивности можно наблюдать между 500 и 700 нм, что соответствует «желтому» свету типичного сцинтилляционного люминофорного покрытия; ИАГ (иттрий-алюминиевый гранат). В сочетании компоненты подсветки InGaN и YAG создают «белый» свет с естественной цветовой температурой (точкой белого), определяемой соотношением InGaN и YAG.

Этот свет фильтруется красными, зелеными и синими субпикселями монитора для воспроизведения широкого диапазона цветов и дальнейшего уточнения точки белого. После фильтрации значительная часть исходной спектральной энергии подсветки теряется; «фильтр» далек от совершенства, и первоначальный спектральный дисбаланс задней подсветки все еще остается основной проблемой. При условии, что фильтры работают должным образом (т. е. монитор правильно откалиброван), ваш типичный монитор с белой светодиодной подсветкой сможет эффективно использовать сильную «чисто-синюю» спектральную составляющую для получения насыщенных «чисто-синих» цветов.Красная и зеленая составляющие (от желтого света люминофорного покрытия YAG) относительно слабы. Эти пробелы в спектральной энергии и относительное отсутствие интенсивности для длин волн, отличных от ~450 нм, ограничивают цветовую гамму типичного монитора со светодиодной подсветкой примерно до цветового пространства sRGB. Цветовая гамма, показанная ниже, сравнивает цветовую гамму Dell U2412M (красный треугольник) с цветовым пространством sRGB (зеленый треугольник). Хотя U2412M сейчас довольно устарел, такой цветовой охват довольно типичен, в частности, для современных моделей с разрешением 1920 x 1080 (Full HD).

При более детальном рассмотрении цветопередачи вы также обнаружите, что «чисто синий» компонент может стать подавляющим. Когда вы смешиваете это с относительно небольшим желтым компонентом (зеленый и красный), будут очевидны некоторые недостатки. Это особенно верно для оттенков, которые в основном синие, но содержат небольшую смесь других цветов; это может показаться нелогичным, но большинство мониторов с белой светодиодной подсветкой не очень хорошо отображают определенные оттенки синего!

Аналогичная история для многих мониторов со стандартной гаммой и подсветкой CCFL при воспроизведении зеленых оттенков.Обычно есть спектральный пик на зеленом и вторичные пики на синем и красном. В этом примере пики красного и синего цветов составляют 40% интенсивности зеленого максимума. Однако важно отметить, что относительная интенсивность этих пиков и распределение энергии для окружающих длин волн значительно варьируются в зависимости от используемых люминофоров.


Глядя мимо синих диодов

Хотя с некоторых точек зрения было бы неплохо достичь sRGB или немного выше, поскольку это обеспечивает немного большую яркость, вы действительно хотели бы достичь следующего «стандарта» гаммы для работы с критически важными цветами и действительно раскрыть потенциал яркости.Первоначально для достижения этого LG Display использовала модифицированный тип подсветки WLED, называемый GB-LED (также известный как GB-R LED или GB-r LED). Вместо синего диода, покрытого желтым люминофором, в задней подсветке используются синие и зеленые диоды с красным люминофором. Как показано ниже, это создает сильные и отчетливые спектральные пики для синего, зеленого и красного цветов, а не дает синий пик и широкую «желтую» область. Красный пик и относительная интенсивность по сравнению с синим и зеленым пиками зависят от используемого люминофора.Можно использовать «люминофоры KSF», которые обеспечивают характерный тройной пик красной энергии, показанный на следующем графике. Технология GB-LED была реализована в различных панелях LG AH-IPS («Усовершенствованная высокопроизводительная плоскостная коммутация»), а также в некоторых панелях Samsung PLS (плоскостная коммутация). Они предназначены для обеспечения покрытия Adobe RGB 98%+ и охвата NTSC 104%+, что на самом деле превышает 98% Adobe RGB и 102% NTSC, типичные для WCG-CCFL.

В настоящее время доступен ряд мониторов с подсветкой GB-LED, в том числе Dell UP2716D, цветовая гамма которого показана выше (красный треугольник) и сравнивается с sRGB (зеленый треугольник) и Adobe RGB (фиолетовый треугольник).У производителя панелей AU Optronics (AUO) есть альтернативный метод достижения широкой цветовой гаммы, который они интегрировали в некоторые из своих панелей AHVA (типа IPS). В них используется смесь красных и синих диодов с зеленым сцинтилляционным люминофором (так называемая конструкция светодиодов RB-LED или RB-G). Конструкция подсветки обоих решений несколько сложнее, чем у стандартного WLED, и по сравнению с ней требует небольшой надбавки к цене.

Улучшение люминофоров

Для подсветки CCFL можно использовать широкий спектр люминофоров, включая люминофоры с широкой цветовой гаммой (WCG-CCFL).Хотя спектр, показанный ранее, довольно типичен для подсветки CCFL со стандартной гаммой, здесь обычно было больше вариаций, чем для подсветки WLED. Но дело движется вперед; когда дело доходит до света, излучаемого подсветкой WLED, появляется все больше исключений, и последние разработки в технологии светодиодной подсветки начали пересматривать наши ожидания от этой технологии. Samsung, один из ключевых производителей современных панелей, был одним из первых, кто действительно внедрил подсветку WLED, и был первым производителем панелей, который применил ее повсеместно для всех новых моделей. Другие крупные производители панелей, такие как LG Display и AU Optronics, уже давно последовали их примеру. В моделях с разрешением 2560 x 1440 (WQHD) или 3840 x 2160 (4K UHD) очень часто используются улучшенные люминофоры с улучшенными спектральными характеристиками для увеличения энергии в «желтой» области. Эти улучшенные или «легированные» люминофоры улучшают покрытие в красной и зеленой частях гаммы, а также расширяют диапазон оттенков синего, которые можно воспроизвести.

Как партнер Amazon я зарабатываю на соответствующих покупках, сделанных по ссылке ниже.По возможности вас перенаправят в ближайший магазин. Дополнительная информация о поддержке нашей работы.

Хотя изначально такая подсветка была относительно редкой на моделях с разрешением 1920 x 1080 (Full HD), число исключений растет. С появлением HDR (High Dynamic Range) и целью DCI-P3 и, в конечном итоге, Rec. 2020 (BT.2020), был сделан большой толчок, чтобы вывести вещи далеко за пределы sRGB.И теперь это можно сделать, не затрачивая сложное решение подсветки с помощью дополнительных диодов альтернативного цвета. Производители панелей, такие как LG, AUO и TPV, рассматривали улучшенные люминофоры как альтернативный метод достижения такого улучшения. LG Display ввела термин «Nano IPS», чтобы подчеркнуть свою улучшенную технологию люминофора, используемую для расширения этого цветового пространства. В частности, в нем используется слой «люминофора KSF» (или K2SiF6, легированный Mn4, для химически настроенных) для достижения превосходного покрытия DCI-P3 ~ 98%.На первом изображении ниже показан спектральный профиль такой подсветки с характерными всплесками красной энергии и относительно низким пиком зеленого. На втором изображении показан цветовой охват, достигнутый Nano IPS, на примере ViewSonic XG270QG. Зеленый треугольник представляет цветовое пространство sRGB, синий треугольник — цветовое пространство DCI-P3, а красный треугольник — цветовую гамму монитора.


Аналогичные усовершенствованные люминофоры используются и в других моделях, в том числе в некоторых относительно доступных моделях.См., например, цветовую гамму, достигнутую AOC 24G2(U) (ниже) с улучшенной (KSF) люминофорной подсветкой WLED. В этом случае он не такой широкий, как реализации Nano IPS, но, безусловно, предлагает щедрое расширение за пределы sRGB.



Samsung и другие производители панелей и CELL (панелей без подсветки), такие как AUO, иногда используют альтернативные средства для достижения расширенной цветовой гаммы. Альтернативная технология была разработана и дорабатывается американской компанией Nanosys.Эта технология называется «улучшающая пленка с квантовыми точками» (QDEF), а подсветку иногда называют QD LED (светодиод с квантовыми точками), а не предпочтительной номенклатурой Nanosys. Синие диоды все еще используются, но люминофорное покрытие и диффузор заменены специальной пленкой из наноскопических люминофоров, называемых «квантовыми точками», как показано ниже.

Триллионы квантовых точек (КТ) присутствуют на пленке. Их можно настроить физически (изменив их размер) для управления длинами волн света, излучаемого при их возбуждении источником света.Синий компонент в изобилии обеспечивается светом, излучаемым самим диодом, в то время как красный и зеленый компоненты обеспечиваются специально настроенными квантовыми точками. Это обеспечивает три отдельных спектральных пика на «синем», «зеленом» и «красном», которые необходимы для охвата расширенных цветовых пространств. Спектр, создаваемый этой системой, вполне сравним с конструкцией GB-LED/RB-LED, с добавлением столь же «чистого» и энергичного красного пика. Это показано на следующем графике, предоставленном Джеффом Юреком (менеджером по маркетингу продуктов Nanosys).

Чтобы узнать больше о том, как обстоят дела с этой технологией с точки зрения монитора ПК, мы напрямую поговорили с Джеффом Юреком. Он сказал нам, что первоначальной целью было интегрировать пленки QDEF в портативные дисплеи, такие как планшетные ПК, но он надеется увидеть хороший интерес и со стороны производителей больших дисплеев. Действительно, технология Nanosys Quantum Dot в настоящее время получила более широкое распространение в дисплеях различных производителей, включая Acer, ASUS, BenQ, MSI и Samsung. Важным преимуществом QDEF является его простая интеграция в существующие конструкции ЖК-дисплеев — пленка тоньше обычного листа бумаги и просто заменяет существующие компоненты.Он также не требует затрат, в отличие от дорогих многодиодных и улучшенных люминесцентных конструкций, которые в настоящее время используются LG Display. «Голый» синий диод не требует отдельной обработки люминофором и вместо этого пропускает свет через пленку, стоимость которой сопоставима с люминофором и диффузором. Кроме того, сама пленка продемонстрировала подходящий срок службы для использования в телевизорах и мониторах с эквивалентным сроком службы более 30 000 часов (что сравнимо с некоторыми из лучших современных светодиодных ламп подсветки).

Основной целью технологии QDEF является предоставление пользователю расширенных цветовых пространств без ущерба для формы, стоимости или функций существующих ЖК-дисплеев. В настоящее время пленка предназначена для обеспечения полного охвата Adobe RGB — даже с более долгосрочным стандартом HDR (High Dynamic Range) Rec. 2020 год в планах. Превосходное покрытие ближайшей целевой гаммы HDR (сильное покрытие DCI-P3) уже было достигнуто с помощью этой технологии в таких продуктах, как Philips 436M6VBPAB и ASUS PG27UQ.Цветовые гаммы ниже показывают решение подсветки Quantum Dot Acer XB323U GP. При настройке «из коробки» или с не экстремальными настройками цветовых каналов эта модель показывает пики красной и, кроме того, зеленой энергии, которые превышают синий пик. Это имеет потенциальные положительные последствия для удобства просмотра (более сбалансированный спектр с более второстепенным компонентом синего света), в то же время обеспечивая широкую цветовую гамму, превышающую 100% Adobe RGB. Красный треугольник показывает цветовой охват монитора, зеленый треугольник sRGB и синий треугольник DCI-P3.Фиолетовый треугольник на втором изображении показывает Adobe RGB.

Благодаря продолжающемуся успеху QDEF компания Nanosys разработала ряд других связанных технологий QD, как описано в их дорожной карте. Сюда входит QDOG (квантовая точка на стекле), которая покрывает стеклянную LGP (световодную пластину) непосредственно квантовыми точками, что позволяет сделать более тонкий дисплей с меньшим количеством слоев при потенциально сниженной стоимости. И QDCC (преобразование цвета квантовыми точками), который заменяет цветной фильтр квантовыми точками для повышения энергоэффективности, яркости и угла обзора.Как бы то ни было, богатая цветовая гамма, достигаемая такими технологиями QD, дает дисплеям возможность более точно имитировать цвета, которые мы можем видеть в реальном мире, и создавать более яркие и реалистичные сцены. Предоставление богатой и красочной игровой площадки для создателей контента и для потребителей. С появлением HDR (расширенного динамического диапазона), как мы вскоре расскажем, такие возможности становятся все более важными.

Другая компания, базирующаяся в Манчестере, Англия, разработала похожее решение.CFQD (безкадмиевые квантовые точки) являются ключевой разработкой Nanoco и, как и пленка QDEF, предназначены для бесшовной интеграции в существующие конструкции ЖК-дисплеев. Подсветка возбуждает квантовые точки, и вместе они способны излучать свет с очень сильной синей, зеленой и красной энергией. Как следует из названия, эта пленка не содержит тяжелого металла кадмия, который используется в QDEF, что является потенциальным экологическим преимуществом, которое теперь разделяет Nanosys. Квантовые точки (CFQD), используемые в пленках Nanoco, изначально производились компанией The Dow Chemical Company в Южной Корее под торговой маркой TREVISTA.Как сообщают южнокорейские новостные источники, такие как The Korea Times, Samsung собиралась использовать эту технологию; действительно, они сделали это для некоторых из своих телевизоров Quantum Dot 2015 года. Похоже, что многие производители теперь предпочитают альтернативу Nanosys.

И последнее, но не менее важное: компания QD Vision из Массачусетса, которую мы упомянули в нашей статье об OLED за их работу над технологией полностью самоизлучающих квантовых точек. В ближайшем будущем они разработали собственную технологию Quantum Dot под названием «Color IQ».В отличие от решения на основе пленки, в нем используются квантовые точки в качестве направляющей (краевой оптики), которая находится между светодиодами и световодом вдоль края дисплея. Два тесно связанных производителя мониторов, AOC и Philips, внедрили технологию Color IQ в некоторые из своих мониторов. Ключевым преимуществом, которое здесь рекламируется, является снижение затрат на достижение эффективного охвата Adobe RGB по сравнению с GB-LED и RB-LED. Протестировав модель с этой технологией (Philips 276E6ADSS), мы, возможно, склонны согласиться с некоторыми утверждениями Nanosys в судебном иске, который они подали против QD Vision в апреле 2016 года. В частности, они заявляют, что решение Color IQ от QD Vision является «плохим имитатором» собственной технологии Nanosys (QDEF): «Результаты говорят сами за себя. Продукты, использующие решение QD Vision, имеют плохую однородность цвета, высокий уровень брака в полевых условиях и, к сожалению, создают впечатление, что квантовые точки — это дешевая технология низкого качества». Несмотря на то, что AOC и Philips опробовали пленку Color IQ, теперь они отдают предпочтение альтернативным материалам, таким как люминофоры KSF, а в некоторых случаях и альтернативным светодиодным решениям QD (ссылаясь на Nanosys).

Использование дополнительных цветов

Однако для точного вывода этого яркого и красочного контента сам контент должен быть специально написан с учетом расширенных цветовых пространств, таких как Adobe RGB. Традиционно единственными пользователями, которые могут должным образом воспользоваться этим преимуществом, являются специалисты по цвету, фотографы и дизайнеры, которые могут создавать и обрабатывать контент с широкой цветовой гаммой. По мере того, как возможности расширенной цветовой гаммы становятся все более распространенными, граница sRGB становится чем-то, что эмулируется, а не естественным технологическим ограничением.Вполне естественно, что по мере того, как устройства становятся все более универсальными, способными должным образом поддерживать расширенные цветовые гаммы, мы наблюдаем отход от границ цветового пространства sRGB. Дизайнеры, кинематографисты и другие представители «индустрии», с которыми мы разговаривали, очень хотят увидеть это, поскольку это позволяет им лучше выражать свои творческие усилия и предлагать потребителю захватывающее развлечение, которого они жаждут. Джефф Юрек повторил это и указал, что Pixar Animation Studios, например, используют обширную цветовую палитру для своих творений, но многие детали теней теряются, когда они уменьшаются и выводятся в sRGB.

Переход на более широкое цветовое пространство не произойдет за одну ночь, и, безусловно, необходимо, чтобы аппаратное обеспечение также поддерживало цветовое пространство sRGB. С некоторым успехом это можно сделать с помощью режимов эмуляции, которые распространены на мониторах с широкой цветовой гаммой. Но может возникнуть некоторая путаница, если разработчики начнут выдавать контент, предназначенный для просмотра на мониторах с широкой гаммой, в то время как другие все еще используют стандартную гамму. Хотя свет в конце туннеля, безусловно, есть.Разработчики игр и фильмов сейчас сосредотачиваются на поддержке HDR (High Dynamic Range) для своего контента, который будет использоваться на дисплеях, обладающих такими возможностями. Сейчас мы наблюдаем увеличение количества контента, который с гордостью может похвастаться поддержкой HDR. В мире дисплеев (который отличается от HDR, используемого в фотографическом смысле) одним из требований является расширенное цветовое пространство. Вышеупомянутая Рек. Цветовое пространство 2020 года является долгосрочной целью, но в ближайшей перспективе производители дисплеев стремятся поддерживать как можно больше DCI-P3 (стандартное цветовое пространство Digital Cinema Initiatives). А используя методы, подобные описанным выше, такого рода дисплеи становятся гораздо более распространенными. Содержимое HDR точно отображается в этом цветовом пространстве, оно расширяет палитру далеко за пределы sRGB и позволяет разработчикам воплощать свои творения в жизнь гораздо более разнообразным и визуально приятным способом. Он также предлагает полезную ступеньку перед Rec. 2020 может быть широко поддержан.

Заключение

Когда впервые появилась светодиодная подсветка, производители были слишком заинтересованы в продвижении того, что, по сути, вводило в заблуждение или даже выдумывало преимущества производительности.Поскольку технология получила довольно широкое распространение, стало совершенно ясно, что ситуация не была «беспроигрышной» в пользу тонкой подсветки «Белый светодиод» (WLED). В некоторых областях, особенно в охвате цветовой гаммы, CCFL могут предложить значительные и хорошо заметные преимущества. Но теперь производители ЖК-панелей подняли планку в этом отношении, используя улучшенные люминофоры и альтернативные схемы диодов для расширения цветовой гаммы.

Параллельно с этим ведутся интересные разработки.Samsung и ряд других производителей внедряют альтернативные технологии для улучшения восприятия, такие как OLED и полностью самоизлучающие QD-дисплеи. Они обещают расширенную цветовую гамму, потрясающую контрастность и отличную отзывчивость. Но для использования в настольных мониторах необходимо решить ряд серьезных технических и экономических проблем. Такие мониторы далеки от того, чтобы быть коммерчески жизнеспособными в потребительском секторе.

Еще одна интересная технология, которая начала распространяться среди потребителей, — это использование квантовых точек в существующих конструкциях ЖК-дисплеев; Решения для светодиодной подсветки QD, такие как пленка Nanosys Quantum Dot Enhancement Film (QDEF).Как и в случае использования улучшенных люминофоров, эти решения обеспечивают превосходную цветопередачу по сравнению с существующей базовой светодиодной подсветкой. В отличие от усовершенствованных диодов и люминофоров, эти продукты работают вместо люминофорных покрытий на простых синих диодах и могут быть реализованы производителями без дополнительных материальных затрат. Цель аналогична усовершенствованным диодным и люминофорным решениям и альтернативным технологиям, таким как OLED (и полностью самоизлучающие квантовые точки). Чтобы расширить цветовую гамму далеко за пределы ограничительного стандарта sRGB.

Мы увидим, как все больше и больше мониторов с комфортом выходят за рамки ограниченного цветового пространства sRGB и корректно отображают альтернативные стандарты, такие как Adobe RGB, DCI-P3 и, наконец, Rec. 2020 (или что-то близкое к этому). Не прибегая к чрезмерно громоздким или энергоемким технологиям. Это даст создателям контента возможность действительно придать сценам желаемый вид с по-настоящему яркими, эффектными и реалистичными цветами. Тем более, что HDR становится ключевым контентом для разработчиков.Это очень захватывающая перспектива для разработчиков игр, кинопродюсеров, художников и дизайнеров — и, конечно же, для потребителей на другом конце.

Как партнер Amazon я зарабатываю на соответствующих покупках, сделанных по ссылке ниже. По возможности вас перенаправят в ближайший магазин. Дополнительная информация о поддержке нашей работы.

 

Пожертвования также приветствуются.

Размер фирмы и интенсивность инвестиций в информационные технологии компаний по страхованию жизни в JSTOR

Абстрактный

Эта статья организована вокруг двух исследовательских вопросов: (1) демонстрируют ли мелкие страховщики более высокую степень интенсивности инвестиций в информационные технологии (т. е. отношение расходов на информационные технологии к общим операционным расходам), чем крупные страховщики? и (2) в какой степени уровень расходов на информационные технологии объясняет степень интенсивности инвестиций в информационные технологии? В статье предлагается интерпретация зависимых и независимых переменных и используются данные, полученные из отрасли страхования жизни. Результаты в целом показывают, что мелкие страховщики тратят большую часть своих операционных расходов на информационные технологии, чем крупные страховщики. Учитывая условия, преобладающие в отрасли страхования жизни, это означает, что крупные фирмы не были лидерами в реализации всего потенциала доступных экономических выгод. Вопреки ожиданиям, увеличение расходов на информационные технологии не приводит к увеличению отношения расходов на информационные технологии к общим операционным расходам. Этот вывод согласуется с наблюдениями нескольких ученых и практиков о том, что то, как технология используется и управляется, является таким же, если не более важным фактором, чем уровень расходов.

Информация о журнале

Редакционной целью MIS Quarterly является расширение и распространение знаний о разработке ИТ-услуг, управлении ИТ-ресурсами, а также использовании, влиянии и экономике ИТ с управленческими, организационными и социальными последствиями. Профессиональные вопросы, затрагивающие область ИС в целом, также находятся в поле зрения журнала.

Информация об издателе

Основанный в 1968 году Университет Миннесотского университета информационных систем управления. Исследовательский центр продвигает исследования по темам MIS, преодолевая разрыв между корпоративный и академический мир MIS через события в MISRC Associates Программа.

(PDF) Влияние прописных и строчных словесных знаков на восприятие бренда

Ссылка

Аакер, Д. А. (1991). Управление капиталом бренда. Нью-Йорк: Свободная пресса.

Арора, Р., и Стоунер, К. (2009). Смешанный подход к пониманию индивидуальности бренда. Журнал

Product & Brand Management, 18 (4), 272–283.

Балачандер, С., и Гхош, С. (2003). Взаимные побочные эффекты: стратегическая выгода от расширения бренда.

Журнал маркетинга, 67 (1), 4–13.

Берлин, Д.Э. (1974). Исследования новой экспериментальной эстетики: шаги к объективной психологии эстетической оценки

. NewYork: Wiley.

Бершайд, Э., Снайдер, М., и Омото, А.М. (1989). Инвентаризация близости отношений: оценка

близости межличностных отношений. Журнал личности и социальной психологии, 57 (5), 792–807.

Боуман, Д., Хейлман, К. М., и Ситхараман, П.Б. (2004). Детерминанты поведения, определяющего соответствие использованию продукта Журнал маркетинговых исследований, 41 (3), 324–338.

Бренгман, М., и Гойенс, М. (2004). Четырехмерное воздействие цвета на эмоции покупателя. Advances

in Consumer Research, 31(1), 122–128.

Брюэр, Пенсильвания (2007). Оперативное психическое расстояние: пересмотренный подход. Journal of International

Marketing, 15 (1), 44–66.

Бро, А. Р., и Исаак, М. С. (2012).

Находим дом для товаров, которые нам нравятся: как покупательское намерение использовать их влияет на цены на бывшие в употреблении товары. Журнал маркетинга, 76 (4), 78–91.

Чайкен, С. (1980). Эвристическая и систематическая обработка информации и использование источника или сообщения

подсказок при убеждении. Журнал личности и социальной психологии, 39 (5), 752–766.

Чайлдерс, Т.Л., и Джасс, Дж. (2002). Все наряжено, чтобы что-то сказать: влияние семантических

ассоциаций шрифта на восприятие бренда и память потребителя. Journal of Consumer Psychology, 12(2), 93–

106.

Чалдини, Р. Б., и Гольдштейн, Нью-Джерси (2004). Социальное влияние: уступчивость и соответствие. Ежегодный обзор

Psychology, 55, 591–621.

Дэвис, Массачусетс (2009). Понимание взаимосвязи между настроением и творчеством: метаанализ.

Организационное поведение и процессы принятия решений человеком, 108(1), 25–38.

Дойл, Дж. Р., и Боттомли, П. А. (2004). Уместность шрифта и выбор бренда. Журнал бизнес-исследований,

57(8), 873–880.

Дойл, Дж. Р., и Боттомли, П. А. (2006). Одет по случаю: соответствие шрифта продукту в восприятии логотипа

. Журнал потребительской психологии, 16 (2), 112–123.

Эдвардс, С. М., Ли, Дж. К., и Ферле, К. Л. (2009). Имеет ли значение место при совершении покупок в Интернете? Восприятие сходства и близости

как показателей психологической дистанции. Журнал интерактивной рекламы, 10(1),

35–50.

Фёрстер, Дж. (2009). Когнитивные последствия новизны и знакомства: как простое знакомство влияет на уровень

истолкования.Журнал экспериментальной социальной психологии, 45 (2), 444–447.

Фёрстер, Дж., Либерман, Н., и Шапира, О. (2009). Подготовка к новым и знакомым событиям: сдвиги в глобальной и

локальной обработке. Журнал экспериментальной психологии: Общие, 138 (3), 383-399.

Гизе, Дж. Л., Малкевиц, К., Орт, У. Р., и Хендерсон, П. В. (2014). Продвижение принципа эстетической середины:

компромиссов в привлекательности и силе дизайна. Журнал бизнес-исследований, 67 (6), 1154–1161.

Грайс, HP (1991). Исследования на пути слов. Кембридж, Массачусетс: Издательство Гарвардского университета.

Хагтведт, Х. (2011). Влияние неполного шрифта логотипов на восприятие фирмы. Журнал

Маркетинг, 75 (4), 86–93.

Хейс, А. Ф. (2013). Введение в посредничество, модерацию и условный анализ процессов: подход, основанный на регрессии. Нью-Йорк: Гилфорд Пресс.

Хендерсон, П. В., и Кот, Дж. А. (1998). Рекомендации по выбору или изменению логотипов.Журнал маркетинга,

62 (2), 14–30.

Хендерсон, П.В., Гизе, Дж.Л., и Кот, Дж.А. (2004). Управление впечатлением с помощью дизайна шрифта. Журнал

по маркетингу, 68 (4), 60–72.

Гесс, Дж. А. (2002). Дистанционное регулирование в личных отношениях: разработка концептуальной модели и тест

репрезентативной валидности. Журнал социальных и личных отношений, 19 (5), 663–683.

Янишевски, К., и Мейвис, Т. (2001).

Влияние сложности логотипа бренда, повторения и интервалов на беглость обработки и суждение. JournalofConsumerResearch, 28(1), 18–32.

Джонс, М. Н., и Мьюхорт, Д. Дж. (2004). Подсчет частоты букв и биграмм с учетом регистра в крупномасштабных

английских корпусах. Методы исследования поведения, инструменты и компьютеры, 36 (3), 388–396.

Клинк, Р. Р. (2000). Создание названий брендов со смыслом: использование звуковой символики. Маркетинговые письма,

11(1), 5–20.

Марк Летт

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.


Настройка браузера для приема файлов cookie

Существует множество причин, по которым файл cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее распространенные причины:

  • В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки браузера, чтобы принять файлы cookie, или спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
  • Ваш браузер спрашивает, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файл cookie.
  • Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Попробуйте другой браузер, если вы подозреваете это.
  • Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы это исправить, установите правильное время и дату на своем компьютере.
  • Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Предоставить доступ без файлов cookie потребует от сайта создания нового сеанса для каждой посещаемой вами страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.


Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в файле cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в файле cookie может храниться только та информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, если вы не решите ввести его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступ к остальной части вашего компьютера, и только сайт, создавший файл cookie, может его прочитать.

.